牧草盲蝽实时定量PCR内参基因的筛选
赤峰市草原工作站;内蒙古草原工作站;中国农业科学院草原研究所;内蒙古农业大学草原昆虫研究中心
- 摘 要：
- 【目的】筛选出适合牧草盲蝽Lygus pratensis在不同条件下稳定表达的内参基因。【方法】选取编码牧草盲蝽α-微管蛋白、β-微管蛋白、肌动蛋白、延伸因子、琥珀酸脱氢酶复合体A、泛素、转录起始因子TFIID亚基、谷胱甘肽S-转移酶、核糖体蛋白L32及TATA盒结合蛋白的10条基因为候选内参基因,采用qRT-PCR技术测定其在牧草盲蝽不同性别成虫、成虫不同组织、不同龄期、对功夫菊酯不同抗性成虫、不同温度及不同杀虫剂分别处理后的成虫共6类样品中的表达量;采用BestKeeper, geNorm, NormFinder及RefFinder 4种计算程序对各候选基因的表达稳定性进行评价。【结果】依据获得的有效qRT-PCR数据前提,利用不同计算方法综合分析得出:在牧草盲蝽成虫不同组织中和对功夫菊酯不同抗性成虫中最稳定表达的内参基因均为RPL32;不同温度处理、不同性别成虫中、不同杀虫剂处理和不同龄期牧草盲蝽中最稳定表达的内参基因分别为UBQ,SDHA,β-tubulin和TAF。通过geNorm软件判断配对变异数确定的内参基因最佳数目,结合RefFinder对基因表达稳定性综合排序的结果可得:牧草盲蝽不同成虫组织中、不同性别成虫中、不同龄期、对功夫菊酯不同抗性成虫中、不同温度及杀虫剂分别处理的成虫等各组的最优内参基因组合分别为RPL32+TAF,SDHA+GST,TAF+GST+UBQ,RPL32+GST,UBQ+ACT+β-tubulin和β-tubulin+TAF+RPL32。【结论】本研究获得的牧草盲蝽在不同条件下表达最稳定及最适内参基因组合,都可用于后续的基因定量表达研究。
关键词：牧草盲蝽;qRT-PCR;内参基因;基因表达分析;表达稳定性
相似文章
-
棉区牧草盲蝽寄主种类及其寄主取食季节性演替规律 [张仁福, 王伟, 刘海洋, 姚举] 新疆农业科学 2022,59 (3) 707-715
-
牧草盲蝽成虫触角超微结构观察 [夏欣, 白顺心, 姚成层, 苟长青, 冯宏祖] 中国棉花 2022,49 (1) 22-25
-
南疆棉田牧草盲蝽及蜘蛛种群的消长动态 [白顺心, 夏欣, 苟长青, 姚成层, 冯宏祖] 中国棉花 2022,49 (1) 17-21
-
取食不同夏季寄主对牧草盲蝽若虫生长发育和成虫寿命的影响 [张仁福, 王伟, 刘海洋, 姚举] 应用昆虫学报 2022,59 (1) 124-133
-
牧草盲蝽对七种寄主植物的趋性行为反应研究 [孙鹏, 杨琪, 刘端春, 苟长青, 冯宏祖] 新疆农业科学 2017 (5) 925-930
-
牧草盲蝽非越冬期和越冬期成虫体内生化物质含量动态变化 [杨琪, 孙鹏, 刘端春, 苟长青, 冯宏祖] 新疆农业科学 2017 (5) 900-906
-
几种生物制剂对牧草盲蝽的室内药效试验 [吴莉莉, 马诗科] 新疆农业科技 2018 (1) 50
-
不同温度对牧草盲蝽种群生长发育和繁殖的影响 [李燕, 杨奥, 冯丽凯, 王佩玲] 植物保护 2015,41 (1) 59-62
-
牧草盲蝽危害对寄主植物体内营养物质含量及保护酶活性的影响 [苟长青, 孙鹏, 刘端春, 迪丽努尔·艾麦提, 冯宏祖] 昆虫学报 2018 (8) 976-983
-
牧草盲蝽对5种寄主植物的行为反应及其种群动态 [王伟, 张仁福, 刘海洋, 姚举] 新疆农业科学 2020 (4) 671-678
