饲料中肠炎沙门氏菌CPA-LFD检测方法的建立
康平县现代农业服务中心;锦州市现代服务学校;锦州医科大学畜牧兽医学院;沈阳市动物疫病预防控制中心
- 摘 要:
- 为建立饲料中肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis,SE)的快速检测方法,针对sdfⅠ基因设计交叉引物,优化反应条件,建立饲料中肠炎沙门氏菌的交叉引物等温扩增联合横向流动试纸条可视化检测法(CPA-LFD).检测条件:反应时间60 min、反应温度63℃、甜菜碱浓度1.2 mmol/L、Mg2+浓度5.0 mmol/L、BST DNA聚合酶8 U、dNTPs浓度0.3 mmol/L.结果显示:检测限为1.0×101 ng/L,与鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、德尔卑沙门氏菌、单增李斯特菌、志贺氏菌等常见菌无交叉反应;对56份疑似污染样品检测结果显示,CPA-LFD法与国标法和PCR法检测结果一致.研究表明,初步建立饲料中肠炎沙门氏菌的CPA-LFD检测方法.
关键词:肠炎沙门氏菌;饲料;交叉引物扩增;可视化核酸检测
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