从萌发的油菜种子中制备脂肪酶

谭小力;魏明玉;袁伟伟

江苏大学生命科学研究院

摘  要：

测定不同萌发期油菜幼苗的脂肪酶活性,采用"盐析→超滤→M-Bondapak-C18柱层析"的工艺路线,建立一种简单且高效的油菜脂肪酶纯化方法。结果表明:通过测定不同培养时间的油菜幼苗的脂肪酶比活力,发现培养6d的油菜幼苗脂肪酶比活力最高,此时期的油菜幼苗适合作为脂肪酶提取的材料;对脂肪酶比活力为1.89U/mg的油菜蛋白粗提物采用盐析法沉淀脂肪酶时,得到脂肪酶的比活力为2.07U/mg,回收率为82.47%;采用截留分子质量为10000D的超滤膜对脂肪酶盐析物进行脱盐和除去小分子杂蛋白处理,得到的脂肪酶的比活力为2.46U/mg,回收率为75.84%;进一步采用M-Bondapak-C18柱层析纯化超滤液,脂肪酶最高比活力为9.14U/mg,回收率为34.13%。所得到的脂肪酶的活性达到了商品化脂肪酶的水平。

关键词：油菜籽种子;脂肪酶;纯化;盐析;超滤;柱层析