鄂马铃薯3号遗传转化体系的构建与表达

高志鹏;杜玉萧;冯霞;余土元;李亚男;陈大清

长江大学发展规划处;仲恺农业工程学院农业与生物学院;长江大学生命科学学院

摘  要：

以鄂马铃薯(Solanum tuberosum L.)3号为试验材料,将含有来源于黄芪的硒代半胱氨酸甲基转移酶基因(AbSMT)的质粒pBinAr进行PCR扩增以及酶切连接构建重组转化子pBI121-AbSMT,运用农杆菌转化法,设置农杆菌菌液浓度梯度、侵染时间以及共培养时间组合进行遗传转化,并且通过PCR鉴定以及GUS组织化学染色进行基因表达验证.结果表明,筛选抗生素是50.00 mg/L的Kan,农杆菌菌液浓度为0.50(OD600 nm),侵染时间为8 min,共培养时间为3 d,能够实现鄂马铃薯3号高效遗传转化,同时成功构建了AbSMT基因转化的鄂马铃薯3号.

关键词：硒代半胱氨酸甲基转移酶(AbSMT);马铃薯(Solanum tuberosum L.);遗传转化;表达分析