CsZFP2基因的克隆及其在烟草中的抗旱功能分析
贵州大学烟草学院;贵州大学茶学院;贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院/山地植物资源保护与保护种质创新教育部重点实验室/山地生态与农业生物工程协同创新中心
- 摘 要：
- 【目的】对茶树ZFP2基因应答干旱胁迫表达进行分析，为进一步深入研究茶树ZFP2基因在植物生长发育与抵御干旱胁迫中的作用机制提供科学数据。【方法】本实验室在前期工作中已通过酵母单杂筛选出一个与F3’5’H基因启动子区域互作的锌指蛋白，利用生物信息学的方法对茶树ZPF2的蛋白结构进行预测和分析，通过农杆菌介导法将CsZFP2基因转入烟草，在模拟干旱胁迫条件下进行功能验证。【结果】茶树（Camellia sinensis,XM＿028257969.1）锌指蛋白的蛋白结构域与烟草（Nicotiana tabacum, XP＿016463943.1）的锌指蛋白相似性为68.57%。茶树锌指蛋白基因内含子数为13个，蛋白长度为1 233 a，蛋白分子量为141 204.45，等电点为5.9，等电点Pi<7表明茶树锌指蛋白富含酸性氨基酸；CsZPF2编码蛋白质主要二级结构为α螺旋且该蛋白是由α-螺旋和β-转角组成无规则卷曲的三维空间结构；CsZPF2编码蛋白质亚细胞定位在细胞核且氨基酸序列小于零部分多于50%，为亲水性蛋白；在自然干旱胁迫28 d后野生型烟草与转基因烟草底部老叶均明显发黄，但野生型烟草底部老叶基本完全失绿，呈枯萎状态，而转基因烟草底部叶片呈轻度萎蔫状态，大部分仍然呈现绿色。【结论】CsZFP2基因能够响应干旱胁迫，并在干旱胁迫应答中起到作用，过表达CsZFP2的转基因植株比野生型植株更具抗旱能力。
关键词：烟草;干旱胁迫;锌指蛋白;抗旱;
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