ubi启动子驱动的花生芪合酶基因表达载体的构建及玉米遗传转化初报

郭志鸿;王汉宁;陶玲;张金文;白斌;陈正华

甘肃农业大学农学院;甘肃亚盛集团博士后科研工作站北京分站;兰州交通大学环境工程学院

摘  要：

研究克隆了玉米的ubi启动子,以pBI 121为基本载体,构建了含有ubi启动子的中间载体pBI UB及ubi启动子驱动的GFP基因的植物表达载体pBI UG;采用基因枪法将载体pBI UG转入洋葱表皮细胞对启动子活性进行检测,结果表明GFP基因在洋葱表皮细胞中得到了表达。本实验同时采用RT-PCR技术克隆了花生的芪合酶基因(Res),该基因编码的蛋白质的氨基酸序列与已公布的芪合酶的氨基酸序列的同源性为99.49 %,并且164位的活性中心Cys没有发生突变;将该Res基因插入载体pBI UB构建了ubi启动子控制下的花生芪合酶基因植物表达载体pBI UA,并对玉米进行了遗传转化,得到了转化苗。

关键词：花生芪合酶基因;玉米ubi启动子;植物表达载体;玉米;遗传转化