大肠杆菌噬菌体抗性菌株与其敏感菌株的比较研究
青岛农业大学动物医学院
- 摘 要：
- 噬菌体抗性菌株的产生是噬菌体治疗领域普遍关注的问题，为研究噬菌体的抗性菌株与其敏感菌株之间的的差别，本研究将大肠杆菌短尾噬菌体Bp4与宿主大肠杆菌共培养，经双层平板法筛选，结果显示获得了对噬菌体具有抗性的大肠杆菌，且该抗性菌株不能被Bp4裂解。将该抗性菌株与其敏感菌株进行了形态及培养特性的比较，发现二者基本一致；基因组测序分析结果显示，与敏感菌株相比，抗性菌株基因组出现3处突变，造成乙醛脱氢酶的天冬氨酸突变为酪氨酸，十一碳二烯磷酸α-N-乙酰氨基葡萄糖磷酸转移酶1的色氨酸发生无义突变，以及UpfB蛋白的亮氨酸发生同义突变；采用玻板凝集试验检测了二者的血清型，结果显示敏感菌株为O78型大肠杆菌，而抗性菌株与O78抗血清凝集现象不明显，表明抗性菌株血清型发生了变化。药敏试验结果显示，与敏感菌株相比，抗性菌株对替米考星、环丙沙星、氨曲南、妥布霉素的耐药性均降低；小鼠的致病性试验结果显示，抗性菌株接种的小鼠未出现死亡，感染后0～48 h前小鼠体况计分一直维持在45分以上，之后略有下降；而敏感菌株接种的小鼠在接种后72 h内共死亡4只，且体况计分比抗性菌株接种的小鼠低约30分，表明噬菌体抗性菌株对小鼠的致病性降低。上述结果表明，本研究获得的噬菌体抗性大肠杆菌的耐药性及致病性均下降，为噬菌体治疗中出现的抗性菌问题提供了参考依据。
关键词：大肠杆菌;抗性菌株;基因组测序;耐药性;血清型;
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