Vps28基因敲除小鼠模型的构建及其对泌乳和免疫性状影响的研究
中国农业大学动物科学技术学院畜禽育种国家工程实验室农业农村部动物遗传育种与繁殖重点实验室
- 摘 要：
- 尽管基于QTL定位和关联分析研究挖掘了许多奶牛产奶性状候选功能基因，然而仅有少数几个基因经过体内外的功能验证。本课题组前期全基因组关联分析（GWAS）研究结果表明Vps28基因与奶牛产奶性状表型显著相关，并在奶牛乳腺组织中特异性高表达。为了深入了解该基因对泌乳性状的作用和功能，本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了Vps28基因敲除小鼠，对其进行体内功能研究。研究结果显示Vps28基因敲除纯合型小鼠（Vps28-/-）极可能导致胚胎早期死亡，故只获得杂合型基因敲除小鼠（Vps28+/-）。敲除小鼠模型构建成功后，检测乳腺组织和脾脏组织中Vps28基因mRNA和蛋白的表达，结果显示与野生型小鼠（Vps28+/+）相比，Vps28+/-杂合型小鼠Vps28的mRNA和蛋白表达量均显著下降。进一步对母鼠的泌乳量、乳房形态和血常规进行检测，发现Vps28敲除母鼠的泌乳量下降，乳头明显凹陷，且血常规中白细胞数量、中性粒细胞数量、淋巴细胞数量和中间细胞数量显著低于野生型小鼠，推测Vps28基因不但影响泌乳，而且影响相关免疫性状。
关键词：CRISPR/Cas9;基因敲除小鼠;Vps28基因;泌乳;免疫性状;
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