仙人掌超氧化物歧化酶的制备研究
广西大学生命科学与技术学院
- 摘 要:
- 对500g仙人掌进行捣碎匀浆、硫酸铵分级沉淀浸提、离心、除杂蛋白、溶解等一系列处理后得到SOD(超氧化物歧化酶)粗酶液。所得粗酶液用聚酰胺(100目)层析柱层析实现纯化,再经过冷冻干燥即得到含有SOD的白色粉末。用联苯三酚法测定该白色粉末具有的酶活力。实验结果显示得到含有SOD的白色粉末酶活力为0.9590×104U/g粉末。影响酶活力大小的外界因素主要包括pH值、温度、抑制剂。结果显示在pH值为7.5~8.5时酶活力最大,稳定性也好。温度维持在25~30℃时酶活力最高。由于过氧化氢和氰化钾能使仙人掌SOD的酶活力显著下降,因而可以判断从仙人掌中提取到的SOD是Cu·Zn-SOD。
关键词:仙人掌;超氧化物歧化酶;提取;纯化;测定
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