乙酰氨基阿维菌素缓释注射剂中乙酰氨基阿维菌素含量与有关物质HPLC检测方法的建立

耿响;刘希望;杨亚军;李剑勇

中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室

摘  要：

试验旨在建立一种高效液相色谱检测方法,同时测定乙酰氨基阿维菌素（EPR）缓释注射剂的主成分与有关物质,采用外标法计算主成分的含量,采用自身对照法计算有关物质的含量。色谱柱为Phenomenex Luna 5μ-C8-100A 250 mm×4.60 mm, 5μm;色谱条件为:流动相为乙腈-0.1%高氯酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.5 mL/min,检测波长为245 nm,柱温为35℃,进样量为20μL。结果表明,EPR缓释注射剂主成分与杂质分离度良好,B1a与B1b之间分离度>3;在EPR浓度为1.5625～1 000μg/mL的范围内线性关系良好;EPR的检测限与定量限分别为0.01和0.34μg/mL,3种精密度的相对标准偏差（RSD）均<2%,稳定性的RSD为0.28%,加样回收率为102.54%,且RSD为3.14%（n=9）。耐用性试验表明,EPR缓释注射剂主成分的分离度均>1.5,理论塔板数>4 500,表明该检测条件的耐用性良好。3批样品中,EPR缓释注射剂含量的平均值为102.60%,B1b占B1a与B1b之和的1.68%,总杂质的平均含量为2.57%。建立的EPR缓释注射剂中主成分含量与有关物质的测定方法具有简便、专属性强、灵敏度高、结果准确等特点,可用于EPR缓释注射剂的质量控制。

关键词：乙酰氨基阿维菌素（EPR）;高效液相色谱法;含量测定;有关物质;