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Position: Home > Articles > 重组鸡白介素2和干扰素α融合蛋白的表达及生物学活性的检测 Journal of Agricultural University of Hebei 2021 (6) 85-91

重组鸡白介素2和干扰素α融合蛋白的表达及生物学活性的检测

作  者:
苗天姿;赵款;雷白时;张武超;庞敬红;梁飞;袁万哲;汪恩强
单  位:
河北伯瑞动物药业有限公司;河北农业大学;河北农业大学动物医学院
关键词:
鸡IL-2;鸡IFN-α;融合蛋白;抗病毒;干扰素刺激基因;
摘  要:
为表达鸡的白介素-2(Interleukin-2,IL-2)和干扰素α(Interferon-α,IFN-α)融合蛋白,并进一步探究融合蛋白的生物学活性,本试验根据GenBank登录的鸡IL-2和IFN-α基因序列,使用linker连接成为嵌合基因,合成pET-32a-rChIL-2-IFN-α原核表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达。通过MTT法检测重组融合蛋白促鸡外周血淋巴细胞(PBLC)增殖活性;通过细胞病变抑制法检测重组融合蛋白在鸡胚成纤维细胞(CEF)上的抗病毒活性;通过RT-qPCR检测了融合蛋白对干扰素刺激基因和内源性干扰素的作用。结果表明,重组融合蛋白促PBLC增殖活性效果显著,在CEF上具有抗VSV活性;重组融合蛋白能够显著地上调CEF中5种干扰素刺激基因和内源性干扰素的mRNA转录水平。综上所述,本试验表达的重组融合蛋白具有促淋巴细胞增殖活性和抗病毒作用,试验结果为进一步探究融合蛋白在鸡体内的活性奠定了基础。

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