当前位置: 首页 > 文章 > 布鲁氏菌DnaJ蛋白的表达及功能分析 中国兽医杂志 2022 (1) 10-15,26
Position: Home > Articles > 布鲁氏菌DnaJ蛋白的表达及功能分析 Chinese Journal of Veterinary Medicine 2022 (1) 10-15,26

布鲁氏菌DnaJ蛋白的表达及功能分析

作  者:
印双红;张俊波;李寅翠;张孟琴;毛宏;易萌;蔡春连;张红;李志强;陈创夫
单  位:
铜仁学院农林工程与规划学院;铜仁学院材料与化学工程学院;石河子大学动物科技学院;商丘师范学院生物与食品学院;铜仁学院大健康学院
关键词:
布鲁氏菌;DnaJ蛋白;原核表达;免疫反应;
摘  要:
本试验旨在运用分子生物学与生物信息学方法对布鲁氏菌DnaJ蛋白进行分析;将该蛋白进行原核表达,并检验纯化蛋白在体外或体内诱导Th1和Th2型免疫反应的能力。以布鲁氏菌M5-90为模板成功扩增目的基因DnaJ,构建重组表达载体pET-30a-DnaJ;利用SDS-PAGE检测DnaJ重组蛋白在大肠杆菌中的表达,并对其进行纯化;用DnaJ蛋白刺激RAW 264.7细胞和小鼠脾细胞,并用DnaJ蛋白免疫小鼠;利用ELISA试剂盒检测细胞因子IFN-γ、IL-4及小鼠血清中IgG1和IgG2a抗体水平的变化。结果显示,DnaJ蛋白二级结构以无规则卷曲结构为主,该蛋白有11个抗原决定簇;SDS-PAGE结果显示,重组菌在37.7 kDa大小的位置有特异表达条带,获得了DnaJ纯化蛋白;DnaJ蛋白可诱导宿主细胞和小鼠产生高水平IFN-γ、IL-4、IgG1和IgG2a抗体。鉴于DnaJ蛋白可在体外或体内诱导Th1和Th2型免疫反应,有望成为布鲁氏菌病的候选亚单位疫苗。

相似文章

计量
文章访问数: 15
HTML全文浏览量: 0
PDF下载量: 0

所属期刊

推荐期刊