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Position: Home > Articles > 卷丹转基因体系构建及岷江百合LrCCoAOMT的导入 Acta Horticulturae Sinica 2020 (7) 1345-1358

卷丹转基因体系构建及岷江百合LrCCoAOMT的导入

作  者:
符勇耀;刘建玲;朱艺勇;徐文姬;雷美艳;杨利平
单  位:
长江师范学院现代农业与生物工程学院;重庆市药物种植研究所
关键词:
卷丹;遗传转化;LrCCoAOMT基因;抗性改良
摘  要:
以卷丹(Lilium lancifolium Thunb.)无菌小鳞片为试材,通过切片处理、优化农杆菌侵染浓度与时间以及重悬液和共培养基成分,构建农杆菌介导的高效遗传转化体系.结果表明,MS+1.5 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1 NAA+30 g·L-1蔗糖是切片芽分化的最佳培养基,添加100 mg·L-1抗坏血酸能有效抑制褐化并促进不定芽增殖.MS+2.0 mg·L-1 NAA+30 g·L-1蔗糖是生根诱导的最佳培养基.抗生素敏感性测试发现,培养基中添加Kan 100 mg·L-1或Hyg 75 mg·L-1结合Cef 400 mg·L-1适宜抗性筛选.GUS染色分析表明,以去除大量元素的改良MS+100μmol·L-1AS和去除大量元素的改良MS+1.0mg·L-16-BA+1.0mg·L-1NAA+100μmol·L-1 AS为重悬液和共培养基,将切片在农杆菌菌液浓度OD600为0.4,侵染15 min,获得81.72%瞬时转化率和25.2%稳定遗传转化率.将岷江百合LrCCoAOMT转化卷丹,分子检测和GUS染色分析表明已获得转基因阳性株系.

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