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3种猪自然细胞毒性受体多克隆抗体制备与鉴定

作  者:
杜谦;杨楠;史腾飞;朱磊;黄勇;童德文
单  位:
西北农林科技大学动物医学学院
关键词:
猪自然细胞毒性受体;NK细胞;蛋白纯化;多克隆抗体;
摘  要:
猪自然细胞毒受体(pNCRs)介导的NK细胞异常激活与多种猪病的发生密切相关。本研究通过原核表达获得了pNCR1、pNCR2和pNCR3胞外域可溶性重组目的蛋白opNCR1、opNCR2和opNCR3,将重组目的蛋白纯化后分别免疫新西兰白兔,获得抗opNCR1、opNCR2和opNCR3多克隆抗体,ELISA测定效价分别为1∶25 600,1∶12 800和1∶25 600。分离猪血液中的NK细胞,利用制备的兔抗opNCR1、opNCR2和opNCR3多克隆抗体,通过Western-blotting和流式细胞术均能特异性检测到猪NK细胞内或膜上pNCR1、pNCR2和pNCR3的表达。本研究获得的兔抗opNCR1、opNCR2和opNCR3多克隆抗体将为进一步研究pNCRs在病原致病过程中作用机制提供材料。
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