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Position: Home > Articles > Establishment and optimization of ISSR-PCR system in Odontotermes formosanus Journal of Anhui Agricultural University 2013,40 (4) 627-630

黑翅土白蚁ISSR-PCR体系的建立与优化

作  者:
龙雁华;濮龙军;李娟;王众;杨云秋
单  位:
中国海洋大学海洋生命学院;安徽农业大学生物技术中心;安徽省蚌埠市白蚁防治研究所;安徽农业大学生命科学学院;安徽农业大学茶与食品科技学院
关键词:
黑翅土白蚁;ISSR-PCR;优化
摘  要:
采用单因子梯度优化的方法,对已初步建立的黑翅土白蚁ISSR-PCR的反应体系在dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度、模板量及TaqDNA聚合酶用量等方面进行了优化。结果表明,适用于黑翅土白蚁的ISSR-PCR反应体系中各因素的最佳浓度分别为:dNTPs 0.2 mmol·L-1,Mg2+3.0 mmol·L-1,引物浓度0.4μmol·L-1,模板用量DNA 20 ng,TaqDNA聚合酶2.5 U。
译  名:
Establishment and optimization of ISSR-PCR system in Odontotermes formosanus
作  者:
LONG Yan-hua1,PU Long-jun1,2,LI Juan3,WANG Zhong4,YANG Yun-qiu5(1.School of life sciences,Anhui Agricultural University,Hefei 230036;2.College of Marine Life Sciences,Ocean University of China,Qindao 266003;3.Biotechnology Center,Anhui Agricultural University,Hefei 230036;4.Institute of Termite Control of Bengbu,Bengbu 233000;5.School of Tea Food Science and Technology,Anhui Agricultural University,Hefei 230036)
关键词:
Odontotermes formosanus;ISSR-PCR;optimization
摘  要:
Single factor test of concentration of dNTP,Mg2+,Taq DNA polymerase,primer and DNA template was used to optimize the ISSR-PCR amplification system which has been established initially.The results showed that suitable ISSR-PCR reaction system for Odontotermes formosanus was 20 μl reaction system containing 2.5 U Taq DNA polymerase,2.0 mmol·L-1 Mg2+,0.1 mmol·L-1 dNTP,1.0 μmol·L-1 primer and 20 ng DNA template.

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