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3种核酸提取方法在病媒生物携带肠道致病菌检测中的应用比较

作  者:
张思祺;何建安;赵纯中;闫俊宇;刘国平
单  位:
长江大学动物科学技术学院;深圳国际旅行卫生保健中心(深圳海关口岸门诊部)
关键词:
肠道致病菌;核酸提取方法;病媒生物;口岸检疫
摘  要:
为比较并筛选出简便、经济、高效的提取病媒生物携带肠道致病菌核酸的方法,采用3种代表性核酸提取方法 ——柱式提取法、磁珠吸附法、盐析法,从模拟感染沙门菌、志贺菌及大肠杆菌的苍蝇和蜚蠊样品中提取核酸,并系统比较核酸质量浓度、荧光定量PCR(qPCR)检测Ct值和细菌回收率,来全面评估各种方法的提取效率。结果显示:3种核酸提取方法中柱式提取法及盐析法均能成功从模拟感染样品中提取核酸,磁珠吸附法未能全部成功提取;通过比较核酸质量浓度、qPCR检测Ct值及回收率,柱式核酸提取法的提取效率最高。结果表明,在检测病毒载量较低的样品,如病媒生物样品时,可选择性价比高、操作简便且结果准确的核酸提取方法(如柱式提取法),以提升检测结果的准确性。

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