侯金秋;吕博;孟凌宇;张薇;秦冬梅

石河子大学医学院第一附属医院;石河子大学药学院/新疆植物药资源利用教育部重点实验室;新疆全安药业股份有限公司

新疆软紫草;脂多糖;RAW264.7细胞;MAPK/NF-κB;抗炎作用;

目的 探讨从新疆软紫草中提取分离得到的咖啡酸四聚体同分异构体（KC-Ⅱ）对脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7巨噬细胞的体外抗炎作用研究。方法 采用MTT比色法检测细胞活力、Griess法检测细胞中NO含量、RT-PCR检测KC-Ⅱ对LPS诱导的RAW264.7细胞中促炎因子的mRNA表达影响，Western Blot检测INOS和COX-2以及Akt、MAPK/NF-κB信号通路的蛋白表达水平，细胞免疫荧光法检测了P-Erk1/2和P-P65蛋白在细胞中的分布以及荧光强度。结果 MTT结果显示，KC-Ⅱ浓度低于300μmol·L^-1时细胞增殖差异无统计学意义；RT-PCR结果显示，与模型组比较，KC-Ⅱ处理组能显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中INOS、COX2、IFN-β以及促炎因子IL-6、TNF-α和IL-1β的表达；Western Blot结果表明，KC-Ⅱ处理组明显抑制INOS、COX2的表达以及MAPK/NF-κB信号通路中Erk1/2、Jnk、P65以及IKKα/β的表达。结论 KC-Ⅱ化合物通过抑制MAPK/NF-κB信号通路的Erk1/2、Jnk、NF-κB以及IKKα/β的蛋白磷酸化表达，从而在LPS诱导的RAW264.7细胞中发挥抗炎作用。