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微滴式数字聚合酶链式反应对香肠制品中鸡、猪、牛源性成分的定量分析

作  者:
刘立兵;陈敏娜;孙晓霞;张亦琴;付琦;钱云开;周巍;郭春海;王建昌
单  位:
石家庄海关技术中心;河北省食品检验研究院;石家庄海关后勤管理中心;秦皇岛海关技术中心
关键词:
微滴式数字聚合酶链式反应;鸡;猪;牛源性成分;定量分析;肉类掺假
摘  要:
为实现肉制品中动物源性成分的定量检测,基于微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chainreaction,ddPCR),以鸡的转化生长因子β-3基因、猪的朊蛋白基因和牛的生长激素基因为靶基因,建立香肠制品中鸡、猪、牛源性成分的定量检测方法.结果表明:所建立ddPCR方法特异性强,能特异性检测相应的鸡、猪、牛源性成分;根据肉粉质量(mg)与DNA质量浓度(ng/μL)、DNA质量浓度(ng/μL)与基因拷贝数浓度(copies/μL)之间的线性关系,得到鸡肉粉、猪肉粉和牛肉粉质量(x1)与基因拷贝数浓度(y2)之间的关系式为:鸡:x1=n*y2/273.946-n/886.557+0.216;猪:x1=n*y2/64.950+n/60.644+0.215;牛:x1=n*y2/62.839+n/12.646+1.218(n为稀释倍数);基于建立的ddPCR方法对64份市售不同种类香肠样品进行检测,62.83912.646在1份原料标识仅为"猪肉"的香肠中检出鸡源性成分含量为18.68%.本研究建立的ddPCR方法能够实现香肠中鸡、猪、牛源性成分的准确定量检测,并可以此判断"蓄意掺假"或"无意带入".

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