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天蚕素B基因在奶山羊乳腺上皮细胞系中的稳定表达

作  者:
尹德云;高学军;佟慧丽;张莉;曲一函
单  位:
东北农业大学
关键词:
CecropinB;真核表达载体;奶山羊乳腺上皮细胞系;转染;基因表达
摘  要:
采用RT-PCR方法,以家蚕cDNA为模板扩增天蚕素B(Cecropin B)基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pECFP-C1,构建CecropinB真核表达载体,经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染奶山羊乳腺上皮细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的奶山羊乳腺上皮细胞系,用RT-PCR及琼脂糖扩散试验检测抗菌肽CecropinB基因及其表达活性。结果成功构建了pECFP-B真核表达载体,并建立了稳定转染的奶山羊乳腺上皮细胞系,成功地表达了目的基因,为进一步研究CecropinB的功能奠定良好的实验基础。
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