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Position: Home > Articles > Generation of Antiviral Transgenic Chicken Using Spermatogonial Stem Cell in Vivo Transfection Chinese Journal of Animal Science 2011,47 (19) 1-6

体内精原干细胞介导法制备抗病转基因鸡

作  者：
孙敏;施青青;阴彦辉;傅德智;秦玉蓉;许峰;李碧春
单  位：
扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物繁育与分子设计重点实验室
关键词：
精原干细胞;EGFP-MMx融合蛋白;转基因鸡
摘  要：
实验旨在利用精原干细胞介导的方法体内转染融合基因EGFP-MMx,制备抗病毒性疾病转基因鸡。采用脂质体包埋法,睾丸内注射EGFP-MMx融合基因,术后采集30、40、50、60、70、80 d睾丸组织进行冰冻切片、基因组PC R、点杂交实验,转染后60 d公鸡精液人工授精于正常母鸡,对后代血液采用PC R检测技术、R T-PC R和W estern blot方法检测外源基因EGFP-MMx的整合表达情况。结果表明:睾丸基因组点杂交阳性率为72.2%。通过PC R、R T-PCR检测方法,在实验公鸡精液和F1代血液中检测到目的基因,精液阳性率为25%,F1代阳性率为10.53%,Western blot检测F1代阳性率为7.89%。结果证明外源基因通过睾丸注射法可整合到基因组上,为培育抗病转基因鸡提供参考依据。
译  名：
Generation of Antiviral Transgenic Chicken Using Spermatogonial Stem Cell in Vivo Transfection
作  者：
SUN Min,SHI Qing-qing,YIN Yan-hui,FU De-zhi,QIN Yu-rong,XU Feng,LI Bi-chun(College of Animal Science and Technology,Key Laboratory of Animal Genetic,Breeding Reproduction and Molecular Design for Jiangsu province,Yangzhou University,Jiangsu Yangzhou 225009,China)
关键词：
spermatogonial stem cell;EGFP-MMx fusion protein;transgenic chickens
摘  要：
In order to cultivate anti-viral transgenic chickens through transfected spermatogonial stem cell with fusion gene EGFP-MMx.After injecting fusion gene EGFP-MMx into testes,we did some testing such as frozen section,PCR and dot blot of testes' tissues of 30 d,40 d,50 d,60 d,70 d and 80 d,a few of normal hen were inseminated artificially with cock semen of 60 d.Finally we detected the integration of exogenous gene EGFP-MMx of the offspring by PCR,RT-PCR and Western Blot.Dot blot positive rate of testes genome was 72.2%.PCR and RT-PCR positive rate was 25% and 10.53%(4/38)in sperm and F1 blood genome respectively,while Western Blot positive rate of F1 blood was 7.89%(3/38).It was proved the possibility of cultivating anti-viral transgenic chickens by the method of testes injection method which can integrate foreign genes into the genome.

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