周敏;宁文;陈红菊;季相山;赵燕

山东农业大学动物科技学院

大山芽孢杆菌;亚硝酸盐;养殖水体;分离;鉴定;

为得到稳定高效降解亚硝酸盐的益生菌,通过菌株富集分离培养、菌株鉴定、发酵培养基优化等实验对菌株进行了分离、鉴定,对菌株降亚硝酸盐效果进行了分析,并克隆了亚硝酸盐还原酶基因。结果显示,从养殖池塘、污水处理厂等5处混合水体中分离、筛选出一株具有亚硝酸盐降解能力的菌株,命名为JY-1。菌株生理生化和16S rDNA序列分析显示, JY-1是大山芽孢杆菌（Bacillus gaemokensis）;发酵培养基优化显示, JY-1的最适氮源和碳源分别是蛋白胨和葡萄糖。JY-1降亚硝酸盐效果分析显示, 3 h JY-1可将水体中0.6 mg/L的亚硝酸盐降到0.0 mg/L。安全性评价检测显示,菌株JY-1菌落周围无溶血环出现,且高浓度JY-1 （10~9 CFU/mL）灌服尼罗罗非鱼对其无明显影响。克隆获得了JY-1亚硝酸盐还原酶基因,结合JY-1对水体中氨氮、亚硝酸盐、总氮等的影响实验,初步推测JY-1是通过酶降解途径把亚硝酸氮还原后将其移出水体的。本研究为制备高效降解亚硝酸盐的微生态制剂产品提供了重要原料。