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苜蓿基因组总DNA提取及RAPD反应条件优化

作  者:
朴政玉;曲柏宏;孙祎龙
单  位:
吉林吉农草业科技发展有限公司;延边大学农学院
关键词:
苜蓿;DNA提取;随机扩增多态DNA分子标记技术;反应条件
摘  要:
采用CTAB改良法,从苜蓿成熟叶片中提取到高质量、高纯度的DNA。对RAPD反应程序的重要参数进行摸索和优化试验,建立的适合苜蓿RAPD分析应用的体系组成为:反应液总体积25μL,模板DNA浓度135 ng.μL-1,10×缓冲液浓度2.5 mmol.L-1,10碱基引物浓度15pmol,Taq DNA聚合酶1U,dNTP浓度1.5mmol.L-1,Mg2+浓度2.5 mmol.L-1。
译  名:
Optimization of Alfalfa Genomic DNA Extraction Method and RAPD Reaction Conditions
作  者:
PIAO Zheng-yu1,QU Bai-hong1,SUN Yi-long2(1.Agricultural College of Yanbian University,Longjing 133400,Jilin,China; 2.Jilin Jinong Grass Industry Science and Technology Development Corporation,Gongzhuling 136100,Jilin,China)
关键词:
alfalfa;DNA extract;RAPD;reaction condition
摘  要:
DNA extraction method,CTAB,could extract high-quality and high-purity DNA from ripe leaves of alfalfa.Based on the genomic DNA extracted from alfalfa,essential factors affecting the result of RAPD assay were tested and compared.An optimal reaction system suitable for the assay and usage of RAPD in alfalfa was established.25μL reaction solution contained 135ng·μL-1 template DNA,2.5mmol·L-1 10×buffering solution,15 pmol random primer,1U Taq polymerase,1.5mmol·L-1 each dNTP,2.5mmol·L-1 MgCl2.

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