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当前位置: 首页 > 文章 > 猪流行性腹泻病毒N蛋白与VeroE6核仁蛋白Fibrillarin的亚细胞定位分析 中国预防兽医学报 2011,33 (11) 833-836
Position: Home > Articles > Subcellular localization analysis between porcine epidemic diarrhea virus nucleocapsid protein and fibrillarin Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine 2011,33 (11) 833-836

猪流行性腹泻病毒N蛋白与VeroE6核仁蛋白Fibrillarin的亚细胞定位分析

作  者：
石达;陈建飞;时洪艳;张志榜;冯力
单  位：
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所猪传染病研究室
关键词：
猪流行性腹泻病毒;核衣壳蛋白;纤维蛋白;共定位
摘  要：
为鉴定猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与VeroE6细胞核仁fibrillarin蛋白的亚细胞定位的特征。本实验参照GenBank中人细胞fibrillarin基因(M59849.1)序列，设计并合成特异性引物，利用RT-PCR方法扩增了VeroE6细胞的fibrillarin基因，并将其克隆于真核表达载体pDsRed2-N1中，构建重组质粒pDsRed-Fib。将pDsRed-Fib与本实验室构建的含有PEDVN基因的重组质粒pAcGFP-N，共转染VeroE6细胞。Westernblot结果表明fibrillarin及N融合蛋白在转染的VeroE6细胞中均获得表达；利用共聚焦显微镜观察显示在共转染VeroE6细胞中PEDVN蛋白与VeroE6细胞核仁中的fibrillarin发生共定位。该结果为进一步研究PEDV和核仁蛋白相互作用奠定基础。
译  名：
Subcellular localization analysis between porcine epidemic diarrhea virus nucleocapsid protein and fibrillarin
作  者：
石达(1);;陈建飞(1);;时洪艳(1);;张志榜(1);;冯力(1)
单  位：
(1)中国农业科学院哈尔滨兽医研究所猪传染病研究室, 兽医生物技术国家重点实验室, 黑龙江, 哈尔滨, 150001
摘  要：
To identify the interaction of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) N protein and fibrillarin in Vero E6 cells, the fibrillarin gene were amplified by RT-PCR from Vero E6 cells with a pairs of primers synthesized according to human fibrillarin gene, and cloned into eukaryotic expression vector pDsRed2-N1 to generate the recombinant plasmids pDsRed-Fib. Vero E6 cells were transfected with plasmids pAcGFP-N and pDsRed2-Fib. Western blot results showed that the fusion proteins expressed in transfected Vero E6 cells. Furthermore, the PEDV N protein and the fibrillarin showed co-localization features in nucleolar of co-transfected Vero E6 cells through confocal microscopy observation. The results would be helpful to elucidate the intereaction of PEDV N protein and nucleolar protein.

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