基于LAMP技术的欧洲樱桃绕实蝇检测方法的建立
作 者:
刘玮琦;赵畅;姜帆;李兰;陈超;丛日赫;梁靓;杨东来;郑敏
单 位:
中国检验检疫科学研究院;满洲里海关技术中心;阿拉山口海关技术中心;西安海关技术中心
关键词:
欧洲樱桃绕实蝇;LAMP;检测
摘 要:
在机场、海港和陆运口岸等入境场所建立快速的现场检疫鉴定方法能够有效防止外来有害生物通过全球商品贸易、旅客携带等方式进行传播和扩散,从而避免造成严重的经济损失。本研究根据欧洲樱桃绕实蝇线粒体细胞色素COI基因序列设计特异的LAMP引物,分别研制了可视化LAMP检测方法和实时荧光LAMP检测方法。结果表明,优化后的可视化LAMP检测体系在62℃、 40 min内可检测低至10pg/μL的欧洲樱桃绕实蝇基因组DNA,且不与其他近似种样品发生交叉反应,可以裸眼直接判断检测结果,具有好的特异性;实时荧光LAMP检测方法的最低检测限为10 ng/μL,检测时间约需90 min。本研究建立的快速、准确、灵敏的可视化恒温扩增体系,可以应用于欧洲樱桃绕实蝇的现场快速检测。
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