马彩优;张晟瑞;李斌;李静;杜维俊;孙君明

中国农业科学院作物科学研究所/作物分子育种国家工程研究中心/农业农村部北京大豆生物学重点实验室;山西农业大学农学院

大豆脂肪氧化酶;比色法;SDS-PAGE;IEF-PAGE;营养品质;低豆腥味;

大豆脂肪氧化酶（LOX）是一种重要的豆腥味因子，为了筛选适宜的LOX鉴定方法和优异的LOX缺失育种亲本，本研究以大豆LOX缺失的近等基因系（Century和Suzuyutaka）和6个低豆腥味品种为材料，采用比色法、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和等点聚焦聚丙烯凝胶电泳（IEF-PAGE）技术鉴定LOX缺失情况，比较3种鉴定方法的优缺点；同时，采用近红外光谱（NIRS）、超高液相色谱（UPLC）、气相色谱（GC）和高效液相色谱（HPLC）等方法分析LOX缺失种质的主要营养品质组分（蛋白质、油分、可溶性糖、脂肪酸、异黄酮、维生素E和类胡萝卜素）含量差异。结果表明：比色法简便快捷，试剂需要现配现用；SDS-PAGE方法简单且成本低，但分辨率较差；而IEF-PAGE方法检测准确性较高，但成本也较高。品质分析发现，Century近等基因系的不同营养品质组分差异显著；而Suzuyutaka近等基因系的蛋白质、油分和类胡萝卜素组分差异显著。综上，针对大量种质材料筛选可先采用比色法进行快速初筛，然后结合IEF-PAGE法进行精准鉴定，既可加速低豆腥味大豆育种进程，同时可降低检测成本。筛选出具有不同营养品质组分的LOX缺失的优异种质，可为低豆腥味大豆品种选育提供可靠的育种和亲本材料。