刘燕;颜成旭;米吉提·莫合他尔汗;贺笋;何传雨;赵海龙;沈国顺;毛开荣

天康生物股份有限公司;新疆维吾尔自治区动物卫生监督所;沈阳农业大学畜牧兽医学院;中国兽医药品监察所

布鲁氏菌温敏凝胶疫苗;黏膜免疫;排菌;免疫抗体;单位保护;

为了研究布鲁氏菌病温敏凝胶疫苗对羊不同黏膜途径免疫的效果,本研究采用冷溶法制备了用于黏膜免疫的布鲁氏菌病温敏凝胶活疫苗（S2株）,将该疫苗以不同黏膜免疫途径（阴道灌注、点眼）、注射免疫途径免疫绵羊,同时以常规S2疫苗作为对照,无菌采集绵羊的免疫部位拭子后培养,通过菌落计数方法计算黏膜免疫部位排菌数,结果显示:凝胶疫苗免疫部位从免疫后第30 min开始停止排菌,常规疫苗的排菌持续到免疫后第2 d。免疫后采集各时间点绵羊血血清,采用微量试管凝集试验（MSAT）和攻菌保护试验分别测定不同免疫途径（阴道灌注、点眼、注射）免疫后产生的抗体水平和保护效果的差异,抗体检测结果显示,黏膜免疫后45 d左右抗体即降至1.50或以下,黏膜免疫后产生的抗体水平明显低于注射免疫产生的抗体,且两种黏膜免疫下降速度均比注射免疫的快;攻菌后的免疫保护结果显示,在对照组出菌指数为4.76情况下,免疫组的单位保护（对照出菌指数-免疫出菌指数）分别达到2.19、2.42、2.78,表明3种免疫方式均具有良好的免疫保护效果,其中阴道灌注的单位保护高于点眼,与注射免疫组更接近。以上结果表明:与常规疫苗相比,温敏凝胶疫苗可有效提升疫苗的安全性。相比点眼免疫,阴道灌注的免疫保护效果更好、安全性更好,虽然点眼抗体反应更弱、持续时间更短,但与阴道灌注相比,对诊断的干扰差异不大。综合以上结果表明,两种黏膜免疫方式中,阴道灌注是较理想的黏膜免疫方式,但黏膜免疫抗体持续时间短于注射免疫。因此,采用布鲁氏菌病温敏凝胶疫苗进行黏膜免疫更有利于鉴别诊断,同时也为新型布鲁氏菌病疫苗的研究提供新的思路。