当前位置: 首页 > 文章 > 尼帕病毒受体结合糖蛋白在哺乳动物细胞中的可溶性表达和纯化及小鼠抗血清制备 中国兽医学报 2022,42 (1) 82-88,106
Position: Home > Articles > Soluble expression and purification of Nipah virus receptor-binding G glyprotein in mammalian cells and preparation of mouse antiserum Chinese Journal of Veterinary Science 2022,42 (1) 82-88,106

尼帕病毒受体结合糖蛋白在哺乳动物细胞中的可溶性表达和纯化及小鼠抗血清制备

作  者:
高子函;宋丽娜;许汪;李乐天;郝鹏飞;伊立超;郝嘉翼;时小双;于成东;李凯;徐鹏;金宁一;李昌
单  位:
军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所中国医学科学院人兽共患病毒病防控关键技术研究创新单元
关键词:
尼帕病毒;病毒受体结合蛋白;真核表达;多克隆抗体
摘  要:
参照GenBank中尼帕病毒受体结合蛋白(G蛋白)编码序列,使用DNAStar软件对各基因型尼帕病毒G蛋白进行核苷酸、氨基酸同源性分析,并绘制进化树,选择代表性毒株(NCBI登录号:AF212302.2),截取合成G蛋白头部结构域(sG)的核苷酸序列,连接至pcDNA3.1(+)真核表达载体上,构建为重组质粒pcDNA-sG,将测序正确的重组质粒在Expi293F细胞中进行表达,利用蛋白免疫印迹(Western blot)进行鉴定.通过Strep-Tactin XT亲和层析纯化目的 蛋白,薄层扫描分析蛋白纯度.用获得的sG免疫小鼠制备抗sG蛋白的多克隆抗体血清,并通过间接ELISA鉴定结合活性.结果 显示,尼帕病毒G蛋白在Expi293F细胞中获得可溶性表达,纯化得到的目的 蛋白大小正确,纯度大于99%;制备的抗血清能特异性结合目的 蛋白.
译  名:
Soluble expression and purification of Nipah virus receptor-binding G glyprotein in mammalian cells and preparation of mouse antiserum

相似文章

计量
文章访问数: 16
HTML全文浏览量: 0
PDF下载量: 0

所属期刊

推荐期刊