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猪盖塔病间接ELISA检测方法的建立与应用

作  者:
孟锦昕;何于雯;杨绍昌;李楠;曾顺玉;徐天刚;王静林
单  位:
关键词:
猪;盖塔病毒;间接ELISA
摘  要:
为建立一种快速、准确、敏感性高、特异性好的猪盖塔病检测方法,采用超速离心纯化的灭活盖塔病毒(Getah virus,GETV)作为抗原包被ELISA板,分别用GETV免疫小鼠腹水和正常小鼠腹水作为阳性、阴性对照,建立检测猪盖塔病的间接ELISA方法.采用棋盘滴定法确定最佳抗原包被质量浓度,为7.795ng/mL;通过对70份阴性猪血清的检测,确定判定标准;特异性试验表明,该方法与同属病毒以及其他易感病毒之间无血清学交叉反应,具有良好的特异性;用所建立的ELISA方法与血清中和试验(SNT)、间接免疫荧光试验同时检测不同GETV抗体效价的猪血清,结果表明该间接ELISA敏感性最高,且检测用时最短;用金标准SNT检验所建立的ELISA方法,结果显示这2种方法的一致性为88.89%,Kappa为0.776,具有较高的一致性.用建立的GETV间接ELISA方法对双江县90份临床样品进行检测,阳性率为47.78%,提示双江县猪群中存在GETV感染,盖塔病对养猪业存在潜在风险.结果表明,成功建立了猪盖塔病间接ELISA检测方法.

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