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Position: Home > Articles > Preliminary study on the prevention and treatment effect of phage against ETEC infection in mice Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine 2022,44 (3) 314-319

噬菌体防治ETEC感染小鼠效果的初步研究

作  者：
胡乐玉;宋鹏;崔嘉琪;邹玲;刘文华;张灿;韩先杰;任慧英
单  位：
青岛农业大学动物医学院
关键词：
产肠毒素大肠杆菌;噬菌体;小鼠;预防保护
摘  要：
为研究噬菌体防治产肠毒素大肠杆菌(ETEC)感染小鼠的效果,本研究通过双层平板法测定噬菌体DS2的效价,并利用双层琼脂空斑试验分别检测噬菌体DS2对致仔猪腹泻大肠杆菌K88、K99及987p的体外裂解作用.结果显示,噬菌体DS2的效价为6.9×109 pfu/mL,且均能裂解上述3种ETEC.进一步经小鼠试验评估噬菌体在体内防治ETEC感染的效果:将噬菌体分别以2×108 pfu/只(高剂量组)、2×107 pfu/只(低剂量组)经腹腔注射接种小鼠,1 h后再经腹腔注射0.2 mL剂量均为3×108 cfu/只的K88、K99及987p混合菌液.分别于感染后12 h、24 h、48 h无菌采集各组小鼠的肝脏,采用平板计数法检测各组小鼠肝脏载菌量;利用双层平板法检测各组小鼠肝脏中的噬菌体含量.感染后24 h,利用ELISA试剂盒检测各组小鼠血清中细胞因子IL-1β含量.感染后48 h,利用内毒素检测鲎试剂盒测定各组小鼠血浆内毒素的含量.小鼠肝脏载菌量和噬菌体含量检测结果显示:与接种LB肉汤的对照组相比,高、低剂量组小鼠的肝脏载菌量在感染后不同时间有升有降,但二者之间或者与对照组之间均无显著差异(P>0.05);随着感染时间的延长,高、低剂量组小鼠肝脏噬菌体的含量均在下降,且在感染后低剂量组小鼠肝脏噬菌体的含量极显著高于(感染后24 h)(P<0.01)或者高于(感染后48 h)高剂量组.IL-1β及内毒素检测结果显示,与对照组相比,高、低剂量组小鼠血清中IL-1β的含量显著下降(P<0.05)或者下降,但高、低剂量组小鼠血浆内毒素的含量均升高或显著升高(P<0.05).将60只小鼠按照上述实验分组及处理,观察并记录感染后72 h内各组小鼠的发病率和死亡率,并统计感染后不同时间每组小鼠的平均体况得分.结果显示,对照组小鼠在感染接近24 h后体况计分降至25分以下,高、低剂量组小鼠在感染24 h后体况计分下降至70分及90分以上.高、低剂量组及对照组小鼠的存活率分别为65%、95%及15%.以上结果表明,DS2噬菌体可有效防治体内外ETEC的感染,且低剂量DS2噬菌体的疗效总体上要优于高剂量.本研究为防治仔猪大肠杆菌病提供了新思路.
译  名：
Preliminary study on the prevention and treatment effect of phage against ETEC infection in mice

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