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玉米弯孢菌叶斑病菌ELISA检测方法的建立

作  者:
刘卉秋;吴素文;曹远银;王玉坤;孙芳
单  位:
沈阳农业大学植物免疫研究所;沈阳农业大学理学院
关键词:
玉米;弯孢菌叶斑病;玉米弯孢菌;多克隆抗体;ELISA
摘  要:
利用玉米弯孢菌叶斑病病原菌菌丝蛋白作为抗原,制备了该病原菌菌丝蛋白的多克隆抗体,建立了检测玉米弯孢菌叶斑病菌的间接ELISA方法。结果表明,玉米弯孢菌抗血清的效价为1∶32 000;最佳抗原、抗体工作浓度分别为5μg/m l和1∶2 000;在最佳抗原抗体工作浓度下,理想包被液为碳酸盐缓冲液(pH值9.6),包被时间为4℃包被过夜;抗原抗体最适竞争反应时间为37℃下1 h;灵敏度为0.02μg/m l,此抗体可以与弯孢菌发生特异性反应,而与其他10种供试病原真菌的菌丝蛋白均呈阴性反应。

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