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Position: Home > Articles > Establishment and Application of Triplex PCR Method for Detecting B .cereus ,S .chromogenes and K.pneumoniae Progress in Veterinary Medicine 2022,43 (7) 1-6

蜡样芽孢杆菌、产色葡萄球菌和肺炎克雷伯氏菌三重PCR检测方法建立与应用

作  者：
胡慧;李田美;姜艳芬
单  位：
西北农林科技大学动物医学院
关键词：
奶牛乳房炎;蜡样芽孢杆菌;产色葡萄球菌;肺炎克雷伯氏菌;三重PCR
摘  要：
针对蜡样芽孢杆菌(B.cereus)的hblA基因、产色葡萄球菌(S.chromogenes)的sodA基因和肺炎克雷伯氏菌(K.pneumoniae)的khe基因,建立了三重PCR检测方法.结果显示,退火温度为54℃,BC-hblA、SC-sodA和KP-khe引物浓度分别为0.6、0.2、0.1μmol/L为最佳扩增条件;对B.cereus、S.chromo-genes和K.pneumoniae的基因组DNA最低检测限分别为35.8、6.3、40.2 pg/μL,菌液最低检测限分别为9.9×103、1.1×103、1.0×104 CFU/mL.特异性试验显示,除这3种菌以外,大肠埃希氏菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、产气荚膜梭菌和腐败梭菌检测结果均为阴性.14份临床乳房炎乳样的检测结果显示,三重PCR方法B.cereus、S.chromogenes和K.pneumoniae的阳性率分别为35.7%(5/14)、14.3%(2/14)和7.1%(1/14),其中蜡样芽孢杆菌的PCR检测阳性率高于细菌分离鉴定阳性率(28.6%),细菌分离鉴定与PCR检测方法的阳性符合率为87.5%.结果表明,成功建立了能够同时检测蜡样芽孢杆菌、产色葡萄球菌和肺炎克雷伯氏菌的三重PCR方法,为引起乳房炎的病原菌的检测补充了新的方法,并为畜牧生产中这3种细菌的快速检测提供了有效方法.
译  名：
Establishment and Application of Triplex PCR Method for Detecting B .cereus ,S .chromogenes and K.pneumoniae

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