当前位置: 首页 > 文章 > 陆地棉转录因子GhWRKY91基因的原核表达及鉴定 安徽农业大学学报 2021 (6) 878-882
Position: Home > Articles > 陆地棉转录因子GhWRKY91基因的原核表达及鉴定 Journal of Anhui Agricultural University 2021 (6) 878-882

陆地棉转录因子GhWRKY91基因的原核表达及鉴定

作  者:
顾丽姣;魏恒玲;喻树迅
单  位:
中国农业科学院棉花研究所;中国农业科学院棉花研究所棉花生物学国家重点实验室
关键词:
棉花;GhWRKY91基因;SDS-PAGE;原核表达;表达分析;
摘  要:
为了筛选出高表达棉花GhWRKY91可溶性蛋白的原核表达载体。以中棉所10号叶片的cDNA为模板PCR扩增GhWRKY91基因,扩增产物分别构建到4个不同的原核表达载体pET-22b(+)、pET-32a(+)、pMAL-c5x和pGEX-4T-1。将重组载体pET-22b(+)-GhWRKY91、 pET-32a(+)-GhWRKY91、 pMAL-c5x-GhWRKY91和pGEX-4T-1-GhWRKY91转化到大肠杆菌菌株BL21(DE3)或Arctic-ExpressTM(DE3)RP中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析不同原核表达载体的蛋白表达情况。结果显示,pET-22b(+)-GhWRKY91和pET-32a(+)-GhWRKY91在BL21(DE3)中以及pMAL-c5x-GhWRKY91在Arctic-ExpressTM(DE3)RP中均未见明显蛋白表达,而pGEX-4T-1-GhWRKY91在Arctic-ExpressTM(DE3)RP中表达的蛋白基本存在于上清中,可获得可溶性蛋白。因此,将GhWRKY91基因构建到pGEX-4T-1原核表达载体上可成功获得可溶性蛋白。

相似文章

计量
文章访问数: 9
HTML全文浏览量: 0
PDF下载量: 0

所属期刊

推荐期刊