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HSD17B12对兔卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响

作  者：
韩旭东;任宇尧;刘燕;赵博昊;吴信生;陈阳
单  位：
浙江省农业科学院畜牧兽医研究所;扬州大学动物与科学学院
关键词：
HSD17B12;兔;颗粒细胞;增殖;凋亡
摘  要：
本实验旨在研究羟基类固醇17-β脱氢酶12（17β Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 12,HSD17B12）对兔卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响。首先克隆了兔HSD17B12基因，进行生物信息学分析；分离原代兔颗粒细胞（Granulosa Cells,GCs），并利用FSHR免疫荧光法进行鉴定；构建HSD17B12基因过表达质粒及干扰RNA，转染GCs，利用qRT-PCR检测HSD17B12对增殖、凋亡相关基因的调控作用，并利用流式细胞、CCK8等方法检测HSD17B12对GCs增殖、凋亡的影响。结果显示：（1）利用FSHR免疫荧光染色，鉴定分离原代细胞是GCs,FSHR表达呈阳性。（2）克隆HSD17B12基因，发现其cDNA全长为938 bp，编码312个氨基酸。进化树显示兔与黑猩猩（Pan Troglodytes）、猕猴（Macaca Mulatta）等聚在一起，鸡（Gallus Gallus）为外支。（3）过表达HSD17B12可以提高增殖相关基因AKT1-1的表达（P＜0.01），降低凋亡相关基因Bad、Fas、FasL、P53（P＜0.01）以及Bcl-2（P＜0.05）的表达；干扰后，对基因的调控作用相反。（4） HSD17B12可促进GCs增殖，抑制GCs凋亡（P＜0.01）。因此，HSD17B12可能通过调控AKT1、Bad、Fas、FasL、P53等基因的表达，显著促进兔GCs增殖，抑制其凋亡，为其在母兔卵巢发育中的作用机制研究提供理论依据。

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