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Journal of Peanut Science
2007,036
(1)
1-6,12
花生△12脂肪酸脱氢酶基因FAD2的克隆及反义表达载体的构建
作 者：
谢金喜;蔡宁波;石新国;庄伟建
关键词：
△12脂肪酸脱氢酶基因;克隆;反义RNA;载体构建
摘 要：
从花生的幼嫩叶片中提取总DNA,应用PCR方法分离到了两个FAD2基因片段,分另4命名为FAD2-1和FA192-2,将反向的FAD2-1和FAD2-2片段分别与所克隆的大豆油体蛋白基因启动子片段oleosin-a与oleosin-b相连,在中间表达载体pSPROK中构建了三个带T-nos的融合基因,进而把融合基因构建到植物表达载体pCAMBIA1300中,酶切鉴定后进行测序,结果表明,所构建的三个植物表达载体均分别带有Oleosin启动子和反义FAD2基因序列,FAD2-2的长度为593bps,与引用序列的同源性达到97％,包含一个起始密码子;FAD2―1的长度为1175bp,与引用序列的同源性达到99％,包含一个起始密码子与一个终止密码子.将构建好的植物表达载体已经转化农杆菌LBA4404并用于侵染花生外植体.
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