中国农业科学院农业信息研究所 中国农学会
Agricultural Information Institute of CAAS China Association of Agricultural Science Societies
En
Ch
中国农业科学院农业信息研究所 中国农学会 主办

AI检索

订阅

返回顶部
当前位置: 首页 > 文章 > 流行性乙型脑炎病毒一步法RT-LAMP检测方法的建立 中国预防兽医学报 2010,32 (10) 773-776
Position: Home > Articles > Development of one step RT-loop-mediated isothermal amplification assay for detection of Japanese encephalitis virus Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine 2010,32 (10) 773-776

流行性乙型脑炎病毒一步法RT-LAMP检测方法的建立

作  者：
杜鹃;宋永;刘立科;华荣虹
单  位：
黑龙江大学生命科学学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
关键词：
流行性乙型脑炎病毒;反转录环介导等温扩增技术
摘  要：
为建立一种简便、快速、灵敏、特异的乙型脑炎病毒(JEV)检测方法,本研究根据GenBank中登录的25株流行性JEV基因组序列,设计3对特异性的环介导等温扩增(LAMP)引物,优化反应体系,建立了一步法反转录-LAMP(RT-LAMP)检测方法。该方法检测时间短,灵敏度比常规RT-PCR方法高,可检测出103TCID50/0.2mL JEV;特异性强,对猪细小病毒、猪圆环病毒、伪狂犬病毒、猪瘟病毒等常见猪病毒均无交叉反应。结果判定时只需要在扩增产物中加入SYBR GreenⅠ染料,就可以直接在可见光或紫外光下观察颜色变化。该方法简便快捷,省时省力,是一种适用于基层实验室快速、准确检测流行性JEV的方法。
译  名：
Development of one step RT-loop-mediated isothermal amplification assay for detection of Japanese encephalitis virus
作  者：
DU Juan1,2,SONG Yong1,LIU Li-ke2,HUA Rong-hong2(1.College of Life Science,Heilongjiang University,Harbin 150080,China;2.State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China)
关键词：
Japanese encephalitis virus;reverse transcription loop-mediated isothermal amplification
摘  要：
To develop a rapid and sensitive method for detecting Japanese encephalitis virus(JEV),an one-step reverse transcription loop-mediated isothermal amplification(RT-LAMP) assay was established using three pairs of specific primers derived from the genome sequences of 25 different JEV strains.The RT-LAMP assay could detect 103 TCID50/0.2 mL of JEV,approximately 10 times more sensitive than RT-PCR.It was highly specific for JEV and had no crossing-reaction with other swine viruses including Porcine parvovirus,Porcine circovirus,Pseudorabies virus and Classical swine fever virus.The assay could be complete within two hours and the results visualized directly or under the UV light with added SYBR Green I dye.Therefore the RT-LAMP assay developed in this study provided a rapid and practical method for JEV detection.

相似文章

导出引用
计量
文章访问数: 11
HTML全文浏览量: 0
PDF下载量: 0

所属期刊

推荐期刊

友情链接Friendly link
农业信息研究所Agricultural information institute 农业智能知识服务平台Agricultural intelligent knowledge service platform 农业学术服务平台Agricultural Knowledge Service System 中国知网CNKI 维普网VIP 万方WANFANG DATA
联系我们Contact us

电话Tell：010-82109652-808

邮箱E-mail：agrijournal@caas.cn

服务Service
关于我们About us 意见建议Opinions and suggest
版权说明Copyright
单位：中国农业科学院农业信息研究所 中国农学会 © 2017中国农业科学院农业信息研究所 ICP备案号：京ICP备09089781号-46