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3种猪病毒多重荧光PCR同步检测和鉴别方法的建立

作  者:
史喜菊;赖平安;张伟;张红梅;刘全国;柏亚铎;徐立伟;种焱
单  位:
中国海关科学技术研究中心;北京市海关
关键词:
伪狂犬病病毒;猪细小病毒;猪圆环病毒2;多重荧光PCR;检测和鉴别;
摘  要:
本试验针对临床上经常混合感染又难以鉴别诊断的伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2(PCV-2),建立了可用于这3种病毒混合感染检测和鉴别诊断的多重荧光PCR方法。所建立的多重荧光PCR扩增效率E值、R2及斜率均在正常范围内,与单一荧光PCR相比,回归系数R2达到了0.999,多重反应体系并没有对扩增产生明显干扰。方法特异性和敏感性测试表明,该方法特异性可达到100%,不存在任何交叉反应,敏感性可以达到10拷贝/μL。对收集的132份阳性样品和122份阴性样品进行检测,多重荧光PCR与单一荧光PCR检测结果完全一致,而且从已知阳性样品中检测出了二重和三重感染,此方法可用于这3种病毒混合感染的同步检测和鉴别诊断。

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