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Journal of Shanxi Agricultural Sciences
2022,50
(1)
9-14
成熟葡萄果实高质量总RNA提取方法的建立
作 者:
闫冬梅;薛美昭;仪慧兰;郝丽宏;乔嘉欣
单 位:
山西大学生命科学学院;山西中医药大学中药与食品工程学院
关键词:
成熟葡萄;改良CTAB法;多糖;多酚;RNA提取
摘 要:
成熟葡萄果实中富含多酚多糖类物质,对提取组织RNA造成了很大的干扰.研究分别采用3种试剂盒法和改良的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法,以成熟的葡萄果实为材料,提取总RNA并检验其产量和质量,其中,改良CTAB法是在提取缓冲液中加入了聚乙烯吡咯烷酮、亚精胺、β-巯基乙醇及高浓度的氯化钠.对各组RNA产物进行质量检测,发现3种试剂盒法均没有得到可用的RNA,只有改良的CTAB法能够从新鲜采摘和贮藏的葡萄果实组织中提取出高质量的总RNA,基本无降解和污染,且得率可达到85μg/g以上.进一步研究表明,改良的CTAB法提取得到的RNA可用于后续的RT-PCR、qRT-PCR和CDS扩增试验.改良CTAB法适用于成熟葡萄果实RNA的提取,所得RNA质量良好,满足后续分子试验的需求.
译 名:
Establishment of Extraction Methods for High Quality RNA from Mature Grape Berry