陈茜茜;伊琳;顾远晖;徐静;贾冠军;吕红英;候明双

甘肃中医药大学;甘肃省人民医院

四海舒郁丸;miRNA-494;甲状腺乳头状癌;PTEN;PI3K/AKT

【目的】探讨四海舒郁丸含药血清对甲状腺乳头状癌细胞miRNA-494及靶基因PTEN和相关通路PI3K/AKT的干预机制。【方法】将2月龄SPF级雄性SD大鼠随机分为四海舒郁丸低、中、高剂量组与空白组，每组5只，灌胃给药后制备四海舒郁丸含药血清和空白组血清（等量生理盐水）并作用于体外培养的细胞。试验组甲状腺乳头状癌细胞选用KTC-1细胞株，分为空白组（2 mL/（100 g·d）生理盐水），低、中、高剂量组（分别为0.24、0.48、0.96 g/（100 g·d）），正常组甲状腺组织细胞选用Nthy-ori-3-1。通过CCK-8探究细胞的活力的影响；RTqPCR检测miRNA-494-5p及PTEN的mRNA表达水平，Western Blot法检测PTEN及下游PI3K/AKT通路蛋白表达水平。【结果】四海舒郁丸能抑制KTC-1细胞的活性，且作用随浓度的增加而增强（P＜0.01），但无时间依赖性；相比较于KTC-1空白组，四海舒郁丸低、中、高剂量组中miRNA-494-5p的mRNA表达均降低（P＜0.01）,PTEN的mRNA表达量增加，其中高剂量组差异有统计学意义（P＜0.05）；高、中、低剂量组中p-PI3K/p-AKT信号通路蛋白表达均明显下降（P＜0.05），而PTEN蛋白表达均有所增加（P＜0.01）。【结论】四海舒郁丸含药血清通过下调miRNA-494-5p后负向调控PTEN进而阻断PI3K/AKT通路对PTC发挥辅助抑癌作用。