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当前位置: 首页 > 文章 > 马泰勒虫和弩巴贝斯虫双重荧光定量PCR检测方法的建立 中国预防兽医学报 2022,43 (12) 1282-1286,1292
Position: Home > Articles > Establishment a duplex real-time PCR method for detection of Theileria equi and Babesia caballi Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine 2022,43 (12) 1282-1286,1292

马泰勒虫和弩巴贝斯虫双重荧光定量PCR检测方法的建立

作  者：
陈克伟;胡哲;郭奎;刘荻萩;戚亭;郭巍;杨光璞;杜承;王晓钧
单  位：
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
关键词：
马梨形虫;马泰勒虫;驽巴贝斯虫;双重荧光定量PCR
摘  要：
马梨形虫病(EP)是由巴贝斯虫属的驽巴贝斯虫(B.caballi)和泰勒虫属的马泰勒虫(T.equi)感染引起的蜱传马属动物疾病.为建立EP两种病原的双重荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中T.equi和B.caballi 18S rRNA基因序列设计特异性引物和探针,经过反应体系和条件优化,建立了能够同时检测T.equi和B.caballi的双重荧光定量PCR检测方法.特异性试验结果显示该方法与马疱疹病毒Ⅰ型(EHV-1),马疱疹病毒Ⅳ型(EHV-4),马流产沙门氏菌(S.abortus equi),马链球菌(S.equi),马传染性贫血病毒(EIAV)均无交叉反应,特异性强.敏感性试验结果显示,该方法对T.equi和B.caballi的质粒标准品的检测下限均为100拷贝/μL,敏感性高;将T.equi和B.caballi的质粒标准品10倍倍比稀释为1×108拷贝/μL~1×104拷贝/μL共5个稀释度,进行组内、组间重复性试验,结果显示该方法的组内、组间变异系数均小于5%,重复性好.利用本实验建立的方法对2019年我国北方西部地区200份马属动物全血样品进行检测,结果显示T.equi的阳性率为47%(94/200),B.caballi的阳性率为2.5%(5/200),其中T.equi和B.caballi混合感染率为1%(2/200),该方法与套式PCR的符合率为97.5%,且该方法具有耗时较短、易操作等特点.本研究首次建立的EP双重荧光定量PCR检测方法对T.equi和B.caballi的鉴别检测、病原监测、流行病学调查等均具有重要的意义.
译  名：
Establishment a duplex real-time PCR method for detection of Theileria equi and Babesia caballi

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