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内质网应激预适应对LPS诱导的山羊子宫内膜上皮细胞炎性反应的保护作用

作  者:
郜康康;扆妍妍;赵一腾;林鹏飞;陈华涛;靳亚平
单  位:
关键词:
内质网应激;子宫内膜炎;脂多糖;NF-κB通路;NLRP3炎性小体
摘  要:
探究内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的山羊子宫内膜上皮细胞(goat endometrial epithelial cells,gEECs)炎性反应中的作用,为阐明ERS在反刍动物子宫内膜炎中的作用机制提供前期基础.本研究使用 ERS激活剂衣霉素(tunicamycin,TM)和抑制剂 4-苯基丁酸(4-phenylbu-tyric acid,4-PBA)分别单独处理gEECs激活或抑制ERS,应用RT-qPCR和 Western blot技术检测ERS对炎症相关基因表达的影响;接着,使用 TM和 4-PBA 分别预处理 gEECs,再利用大肠杆菌 LPS 处理诱导 gEECs 炎性反应,通过 RT-qPCR和 Western blot检测 ERS对 LPS诱导的 gEECs 炎性反应的影响及作用机制.结果显示,TM处理激活 ERS显著抑制gEECs中炎性细胞因子IL-6 和TNF-α mRNA的表达(P<0.05),显著抑制经典炎症通路相关基因TLR4、NF-κB P65 和NLRP3 mRNA的表达(P<0.01);同时,显著抑制NF-κB P65 蛋白的磷酸化以及NLRP3 蛋白的表达(P<0.05).4-PBA处理则显著促进gEECs中炎症相关基因(IL-6、TNF-α、TLR4、NF-κB P65 和NLRP3)的表达(P<0.05).进一步研究发现,TM 预处理 gEECs 显著抑制 LPS 诱导的炎性细胞因子IL-6 mRNA的表达(P<0.05);显著抑制 LPS 诱导的TLR4、NF-κB P65 和NLRP3 mRNA 的表达以及 NF-κB P65 蛋白的磷酸化和 NLRP3 蛋白的表达(P<0.05).4-PBA预处理 gEECs 则显著促进 LPS诱导的 gEECs 炎性反应(P<0.05).综上表明,ERS通过抑制NF-κB通路和NLRP3 炎性小体通路的激活减轻LPS诱导的gEECs炎性反应,为进一步阐明山羊子宫内膜炎的发生发展提供了前期理论基础.
译  名:
Protective Effect of Endoplasmic Reticulum Stress Preadaptation on LPS-Induced Inflammatory Response in Goat Endometrial Epithelial Cells
关键词:
endoplasmic reticulum stress%endometritis%lipopolysaccharide%NF-κB pathway%NLRP3 inflammatory vesicles

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