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鸡毒支原体与滑液囊支原体双重PCR检测方法的建立与应用

作  者:
朱小甫;吴旭锦;李怡婷;孙凯
单  位:
西咸新区凯歌牧业有限公司;旬邑县动物疫病预防控制中心;咸阳职业技术学院畜牧兽医研究所咸阳市动物疫病分子生物学诊断技术研究重点实验室
关键词:
鸡毒支原体;滑液囊支原体;双重PCR;检测;
摘  要:
为建立鸡毒支原体(MG)与滑液囊支原体(MS)双重PCR检测方法,一次反应即可诊断鸡毒支原体与滑液囊支原体感染情况。根据GenBank公开的MG和MS基因序列,设计了2对质粒构建引物和2对检测引物,优化检测反应体系与条件,进行灵敏性试验、特异性试验和临床检测应用。结果显示,该方法对MG和MS阳性质粒的最低检测限为10拷贝/μL;与常见的H9禽流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、Ⅰ群禽腺病毒4型、副鸡嗜血杆菌和鸡大肠埃希氏菌6种病原无交叉反应;应用该方法检测335份样品,MG单阳性率为7.8%,MS单阳性率为31.3%,MG和MS双阳性率为17.0%,两种支原体总的感染率为56.1%。成功建立了检测MG和MS的双重PCR检测方法,为流行病学调查和诊断提供了可靠的技术手段。

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