张欣;姜轩;付超;赵瑞利;马吉飞;潘晨浩;胡烨;丁巧玲;葛秀国

天津农学院动物科学与动物医学学院;天津农学院附属动物医院

耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌;生物被膜;凝固酶;耐药基因;分离鉴定

为了对从临床患病犬皮肤采集的样品进行分离菌鉴定,并了解犬源伪中间型葡萄球菌(Staphylococcus pseudintermedius)的生物被膜形成能力,试验对采集的临床患犬的皮肤样品通过染色镜检、触酶试验、血浆凝固酶试验、耐热核酸酶试验进行鉴定,并对分离菌进行药敏试验,对16S rRNA基因、凝固酶(Coagulase)基因、MecA基因及生物被膜主要基因(ica、sarA)进行PCR扩增,同时对Coagulase、MecA基因的PCR扩增产物测序并进行BLAST比对分析。结晶紫染色定量法检测分离菌的生物被膜形成能力,扫描电镜(SEM)观察生物被膜的形态结构。结果表明:染色镜检、触酶试验、血浆凝固酶试验初步确定分离菌为葡萄球菌,耐热核酸酶试验初步确定为伪中间型葡萄球菌。分离菌对红霉素、头孢哌酮、哌拉西林等抗菌药物表现为中介或耐药,对多西环素、四环素、米诺环素等敏感。16S rRNA基因、Coagulase基因、MecA基因及生物被膜主要基因(ica、sarA)PCR扩增结果均为阳性,16S rRNA基因、MecA基因扩增产物测序结果表明,分离菌为耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌。结晶紫染色定量法检测结果表明,该分离菌可形成中等黏附。电镜检测可见菌体呈球形,菌体聚集成簇,细菌间有黏液样物质,且菌体表面被大量丝状黏性物质包裹,即菌体分泌的大量胞外物质。说明本试验分离得到耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌,该分离菌具有生物被膜形成能力。