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南方根结线虫MiV901基因在拟南芥中的异源表达及其表型分析

作  者:
周仁鹏;法杨;王暄;于家荣;徐丽娜;李红梅
单  位:
南京农业大学植物保护学院农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室
关键词:
南方根结线虫;类毒液过敏原蛋白;拟南芥;异源表达;灰葡萄孢;
摘  要:
为明确南方根结线虫Meloidogyne incognita效应蛋白MiV901在其寄生过程中的生物学功能,通过构建MiV901基因的植物表达载体,利用根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的花序浸染法将其转化拟南芥Arabidopsis thaliana,并采用室内人工接种法测定转基因植株对灰葡萄孢Botrytis cinerea侵染及南方根结线虫寄生的影响。结果显示:经Southern blot检测,MiV901基因以不同的拷贝数插入到转基因拟南芥株系901-6、901-8和901-12的基因组中,且q PCR检测结果证实MiV901基因能够正常表达。3个转基因拟南芥株系901-6、901-8和901-12叶部接种灰葡萄孢3 d后,叶片上形成的病斑平均直径分别为1.00、1.06、1.05 cm,比野生型对照扩大了9.9%~16.5%。相比野生型对照,转基因拟南芥株系901-12、901-6和901-8接种南方根结线虫2龄幼虫后根系上产生了更多的雌虫和卵块,雌虫数分别显著增加了45.4%、34.4%和23.7%,卵块数分别显著增加了51.2%、46.3%和31.7%。表明异源表达MiV901基因能够抑制植物免疫,增加拟南芥对灰葡萄孢和南方根结线虫侵染的敏感性。

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