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橘色双冠丽鱼体色相关基因mitf的结构及表达调控特性

作者：

陈旭东;邬国强;宋红梅;汪学杰;牟希东;刘奕;刘超;胡隐昌

单位：

中国水产科学研究院珠江水产研究所农业农村部休闲渔业重点实验室广东省水产动物免疫技术重点实验室;上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心

关键词：

橘色双冠丽鱼;小眼畸形相关转录因子（MITF）;qRT-PCR;黑色素细胞;

摘要：

为了解小眼畸形相关转录因子mitf基因在鱼类早期体色褪黑过程中的调控作用，本研究采用c DNA末端快速扩增（RACE）技术获得橘色双冠丽鱼（Amphilophus citrinellus） mitf基因c DNA序列全长，利用实时荧光定量PCR （qRT-PCR）技术检测其在橘色双冠丽鱼胚胎不同发育时期、体色褪黑不同时期和各个组织中的表达规律。获得mitf基因2个亚型，其中，mitf1的cDNA全长为1816bp，包括5’非编码区（UTR） 158 bp、3’UTR 428 bp、开放阅读框（ORF） 1230 bp，共编码409个氨基酸；mitf2的c DNA全长为1638 bp，包括5’UTR 160 bp、3’UTR 428 bp和ORF 1050 bp，共编码349个氨基酸。同源性和系统进化分析显示，mitf1和mitf2聚在一小支，与慈鲷科（Cichlidae）鱼类同源性最高，与哺乳类动物同源性较低。qRT-PCR结果显示，在成鱼各个组织中，mitf1和mitf2均有不同程度表达，其中，眼部表达量最高且显著高于其他组织（P<0.05），肌肉、脑和肾脏也有较高表达；mitf1和mitf2在胚胎各个发育时期均有表达，在受精卵时期表达量最高，显著高于其他胚胎期；随着橘色双冠丽鱼体色由黑色过渡到橘黄色，mitf1和mitf2在鱼皮肤、鳞片、尾鳍中的表达均呈逐渐下降的趋势，表明mitf基因表达与鱼体色由黑到黄转变的表型间存在关联性，推测与鱼体色发育阶段色素细胞的分化和分布比例的动态变化相关。本研究通过了解鱼类体色发育和变异的分子基础，可为鱼类色素细胞发育和体色人工改良积累资料。

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