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Animal Husbandry & Veterinary Medicine
2015,47
(1)
76-81
稳定表达猪skMLCK基因的小鼠成肌细胞株构建及鉴定
作 者：
丛玲;田玉民;张尚松;朱弘焱;苏玉虹
单 位：
辽宁医学院畜牧兽医学院
关键词：
skMLCK基因;C2C12细胞株;稳定表达;猪
摘 要：
为了获得稳定表达猪skMLCK基因的小鼠成肌细胞C2C12细胞株,将猪skMLCK基因cDNA序列T-A克隆至pMD-18T载体;重组质粒经双酶切后,定向克隆至真核表达载体,获得表达重组质粒pEGFP-N1-skMLCK;经脂质体介导,重组质粒稳定转染入C2C12细胞中;通过实时定量PCR方法检测skMLCK基因的表达水平,以及其他相关基因的表达情况。结果:获得了稳定表达猪skMLCK基因的C2C12细胞株;连续培养30d后,用实时定量PCR方法检测到skMLCK基因高表达,同时发现CFL2b和MEF2C基因表达下调。试验表明稳定表达猪skMLCK基因的小鼠成肌细胞系构建成功,为猪skMLCK基因功能的进一步研究提供了前期工作基础。
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