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表达鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白重组乳酸乳球菌的构建及其表达的优化

作者：

张旺;刘琳琳;祁小乐;高玉龙;王永强;高宏雷;李凯;高立;刘长军;张艳萍;王笑梅;崔红玉

单位：

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽免疫抑制病创新团队

关键词：

鸡传染性法氏囊病毒;重组乳酸菌;VP2蛋白

摘要：

鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)的VP2蛋白是该病毒的主要抗原蛋白,为制备乳酸菌黏膜免疫口服疫苗,本研究采用乳酸乳球菌(L.lactis)及其Nisin诱导的表达系统,对VP2基因进行密码子优化,构建了表达IBDVVP2蛋白的重组乳酸乳球菌L.lactis/p NZ-VP2。经正交试验对诱导条件进行优化,重组VP2蛋白(r VP2)表达量比优化前明显提高,最终得到最佳诱导条件为:OD600nm=0.5开始诱导,Nisin终浓度为2 ng/m L,诱导时间为5 h,r VP2表达量达到最大值38μg/m L。经western blot检测,r VP2能够持续性表达并具有良好的抗原性。该重组乳酸菌的构建为进一步体内免疫实验奠定了基础。

译名：

Construction and optimization of recombinant Lactococcus lactis expressing avian infectious bursal disease virus VP2 protein

作者：

ZHANG Wang;LIU Lin-lin;QI Xiao-le;GAO Yu-long;WANG Yong-qiang;GAO Hong-lei;LI Kai;GAO Li;LIU Chang-jun;ZHANG Yan-ping;WANG Xiao-mei;CUI Hong-yu;Division of Avian Infectious Diseases,State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences;

关键词：

infectious bursal disease virus;;recombinant Lactococcus;;VP2 protein

摘要：

Avian infectious bursal disease virus(IBDV) VP2 protein is the major antigen protein,in order to prepare mucosal immunity vaccine for chicken,the codon usage biased vp2 gene was inserted into p NZ8149 vector and transformed into the Lactococcus lactis to generate L.lactis/p NZ-VP2 which expressed the recombinant VP2 protein(r VP2) by Nisin system.Under the optimized inducing conditions,i.e.the L.lactis/p NZ-VP2 was induced at OD600nm=0.5 with 2 ng/m L nisin for 5 hrs,then the r VP2 expression increased significantly up to 38.0 μg/m L.The r VP2 was detected by VP2 monoclonal antibody after induced for 3 to12 hrs.The construction of L.lactis/p NZ-VP2 lays a foundation for IBDV lactic acid bacteria immunological experiment in vivo.

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