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丁香疫霉菌RPA/CRISPR-Cas12a快速检测方法的建立

作者：

雷荣;孙夕雯;江丽;王振华;李国庆;李远;廖晓玲;吴品珊

单位：

中国检验检疫科学研究院;沈阳农业大学土地与环境学院;重庆医科大学永川附属医院;重庆理工大学;湖北省武汉市海关;华中农业大学

关键词：

丁香疫霉病菌;重组酶聚合酶扩增;CRISPR-Cas12a;快速检测

摘要：

丁香疫霉病菌(Phytophthora syringae,PS)造成数十种蔷薇科植物严重病害,是我国的植物检疫性有害生物.本研究根据GenBank中PS的Ras-like protein(Ypt1)基因,建立重组酶聚合酶等温扩增结合CRISPR-Cas12a系统的荧光法和侧向流层析试纸条快速检测方法,以实现在田间或口岸快速、准确、灵敏检测丁香疫霉病菌的目的.本研究优化了 RPA/CRISPR-Cas12a的反应条件,考察了特异性、灵敏度以及实际样品检测能力.结果表明,该方法37℃扩增40min,能特异性地检测丁香疫霉菌,灵敏度为133fg,与荧光定量PCR相当.本研究建立的快速检测方法可用于丁香疫霉菌的快速诊断.

译名：

Development of rapid detection for Phytophthora syringae based on RPA/CRISPR-Cas12a

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