当前位置: 首页 > 文章 > 检测寨卡病毒核酸的RT-LAMP可视化方法的建立 中国兽医学报 2024,44 (8) 1698-1703
Position: Home > Articles > 检测寨卡病毒核酸的RT-LAMP可视化方法的建立 Chinese Journal of Veterinary Science 2024,44 (8) 1698-1703

检测寨卡病毒核酸的RT-LAMP可视化方法的建立

作  者:
宋雨濛;黄培;金宏丽;焦翠翠;白玉洁;张梦瑶;龚志远;李媛媛;张海丽;王化磊
单  位:
长春西诺生物科技有限公司;吉林大学动物医学学院人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室/教育部人兽共患病研究重点实验室
关键词:
寨卡病毒;环介导等温扩增;免疫层析试纸条;核酸可视化检测
摘  要:
为建立简单、便捷、灵敏、特异的寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)快速检测方法,本研究通过对不同时间、不同地区分离的ZIKV全基因组序列进行分析,筛选ZIKV NS5基因保守区为靶标,同时设计特异性引物及探针,结合RT-LAMP恒温扩增技术和免疫层析技术,成功构建ZIKV反转录环介导等温扩增核酸可视化(RT-LAMP-VF)检测方法。结果显示,该方法具有良好的特异性和敏感性,当内、外、环引物比为FIP∶LF∶F3=4∶2∶1时,在61℃条件下恒温扩增45 min,可特异性检测到10~2 copies/μL的RNA标准品以及2.15 pfu的ZIKV,且与其他黄病毒(日本乙型脑炎病毒、猪瘟病毒)等无交叉反应。血液组织中的其他RNA不影响RT-LAMP-VF的敏感性和特异性,表明该方法可用于临床样本ZIKV的检测。本研究建立的ZIKV RT-LAMP-VF检测方法操作简单、不需要特殊仪器设备,尤其适用于基层单位ZIKV的现场快速检测,为ZIKV病的现场快速检测和预警预报体系的建立提供技术支持与物质保障。

相似文章

计量
文章访问数: 8
HTML全文浏览量: 0
PDF下载量: 0

所属期刊

推荐期刊