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Animal Husbandry & Veterinary Medicine
2020
(5)
123-127
神经退行性疾病转基因猴模型的构建及相关技术体系建立
作 者：
吴彩霞;刘朝明;张全军;颜泉梅;赵宇;张秀娟;刘晓明;欧阳振;樊娜娜;赖良学
单 位：
关键词：
卵胞浆内单精子显微注射;体外受精;猴;疾病模型
摘 要：
非人灵长类动物因与人有最近亲缘关系而成为研究人类生命领域最高级模式动物.本研究采用慢病毒载体技术结合胚胎工程技术,拟建立一套高效简便转基因猴制作技术体系,建立小脑共济失调转基因猴模型,为该病研究提供最为理想动物模型,同时为建立其他疾病转基因猴模型提供技术路线.利用卵泡浆内单精子显微注射技术(Introeytoplasmiesperm injection,ICSI)技术总共构建88个体外受精胚胎,经过体外培养共计32枚发育到原核期并进行病毒注射后移入7只受体猴输卵管内.B超妊娠检测,怀孕3只,其中:1只未能发育到期中间流产,1只发育到期生1死胎,1只顺产生1只活试管猴,经过人工喂养奶粉后健康存活,但经检测转基因为阴性.本研究虽然未能通过病毒注射获得阳性转基因猴,但对食蟹猴(Macaca fascicularis)超数排卵及B超监测卵泡发育技术、卵母细胞回收及体外成熟培养技术、电刺激采精及精子获能技术、食蟹猴体外受精技术和胚胎体外培养技术以及胚胎移植等技术体系进行多次探索和优化,并成功建立相关技术平台,将为后续利用试管猴技术结合高效的TALEN和CRISPR/Cas9等基因编辑工具获得各种疾病模型奠定基础.
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