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Position: Home > Articles > Cloning and Prokaryotic Expression of Phosphoglucomutase Genes cPGM and pPGM from Jatropha curcas Acta Agriculturae Boreali-Sinica 2021,36 (4) 23-30

小桐子磷酸葡萄糖变位酶cPGM与pPGM基因的克隆及原核表达分析

作  者:
王海波;李芙蓉;杨金翠;高永;郭俊云
单  位:
曲靖师范学院生物资源与食品工程学院
关键词:
小桐子;磷酸葡萄糖变位酶;基因克隆;原核表达
摘  要:
为了探究磷酸葡萄糖变位酶(PGM)在植物蔗糖与淀粉代谢中的重要作用,基于同源序列比对的方法,在小桐子基因组中鉴定到1个细胞质型PGM基因(命名为JccPGM)与1个叶绿体型PGM基因(命名为JcpPGM),利用qRT-PCR方法检测JccPGM与JcpPGM基因在小桐子不同器官与低温条件下的表达特性,同时,构建了pGEX-4T-1-JccPGM与pGEX-4T-1-JcpPGM原核表达载体并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了表达分析.结果表明:两者分别编码582,637 aa的蛋白质.聚类分析表明,小桐子pPGM在其N端包含叶绿体定位信号肽,而cPGM较pPGM多4段肽链序列-108 VGVDGS113-、-183 SGPE186-、-283 GKSNSE288-、-470 SLGEVN475-.qRT-PCR表达分析显示,小桐子cPGM与pPGM基因都在叶片中高表达,而在根与种子中表达量较低.通过BL21(DE3)诱导表达,分别得到90.7,97.0 ku的蛋白条带,与理论融合蛋白的分子量一致.综上所述,本研究为开展小桐子cPGM与pPGM基因表达蛋白的功能分析以及其在蔗糖与淀粉积累、逆境应答中的机制研究奠定了基础.
译  名:
Cloning and Prokaryotic Expression of Phosphoglucomutase Genes cPGM and pPGM from Jatropha curcas

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